Cinco elementos de la reacción de PCR
Hay cinco sustancias principales que participan en la
PCR reacción: cebadores (los cebadores de PCR son fragmentos de ADN y los cebadores para la replicación del ADN intracelular son hebras de ARN), enzimas, dNTP, moldes y tampones (que requieren Mg2).
Determinantes específicos de PCR reacciones ① La combinación específica y correcta de cebadores y ADN molde;
②Principios del emparejamiento de bases;
③La fidelidad de la reacción de síntesis de polimerasa de ADN Taq;
④ Especificidad y conservación de genes diana.
La combinación correcta de cebadores y plantillas es la clave. La combinación de cebador y plantilla y la extensión de la cadena del cebador siguen el principio de apareamiento de bases. La fidelidad de la reacción de síntesis de la polimerasa y la resistencia a altas temperaturas de la polimerasa TaqDNA permiten que la combinación (renaturalización) de la plantilla y el cebador en la reacción se lleve a cabo a una temperatura más alta, la especificidad de la combinación aumenta considerablemente y la fragmento de gen diana amplificado También puede mantener un alto grado de precisión. Luego, al seleccionar la región del gen diana con alta especificidad y conservación, el grado de especificidad será mayor.
Preguntas frecuentes sobre PCR reacciones 1. Falso negativo
2. negativo
3. Falsos positivos